WB样本煮的时间久一点还能用。

western blot样品煮蛋白后结块是经常会有现象。如果是SDS-PAGE，加了上样缓冲液后依然煮蛋白后结块，那说明蛋白样品浓度过高，已经超出了SDS可以结合的浓度。建议降低样品的浓度即可。如果没有加含有SDS的上样缓冲液，那么就是蛋白样品被煮沸后变性沉淀了。加入溶解剂即可。

1、将A和B两种试剂在保鲜膜上等体积混合;1min后，将膜蛋白面朝下与此混合液充分接触;1min后，将膜移至另一保鲜膜上，去尽残液，包好，放入X-光片夹中。

2、在暗室中，将1×显影液和定影液分别倒入塑料盘中;在红灯下取出X-光片，用切纸刀剪裁适当大小(比膜的长和宽均需大1cm);

打开X-光片夹，把X-光片放在膜上，一旦放上，便不能移动，关上X-光片夹，开始计时;根据信号的强弱适当调整曝光时间，一般为1min或5min，也可选择不同时间多次压片，以达最佳效果;曝光完成后，打开X-光片夹，取出X-光片，迅速浸入显影液中显影，待出现明显条带后，即刻终止显影。